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 selezionare cellula trasfettate stabilmente in mammiferi
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m.ari
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Prov.: Livorno


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Inserito il - 21 luglio 2010 : 10:51:08  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di m.ari Invia a m.ari un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
una domanda:
č possibile distinguere cellule trasfettate stabilmente da quelle trasfettate ma in cui non č avvenuta integrazione, se non č prevista ricombinazione omologa? (e quindi non possibile usare nč il metodo pos-neg con gentacna+ganciclovir, nč selezionare tramte pcr)?

Sicuramente č una domanda idiota (penso anche che la risp sia no...), perō nelle slides della prof non č molto chiaro... :(

grazie!

Patrizio
Moderatore

mago

Cittā: Barcellona


1914 Messaggi

Inserito il - 21 luglio 2010 : 11:09:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Patrizio  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Patrizio Invia a Patrizio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
con una PCR inversa ci riesci


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m.ari
Nuovo Arrivato

Prov.: Livorno


47 Messaggi

Inserito il - 21 luglio 2010 : 11:11:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di m.ari Invia a m.ari un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
come?
mi amplifica anche i messaggeri dei vettori non integrati... no?
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Patrizio
Moderatore

mago

Cittā: Barcellona


1914 Messaggi

Inserito il - 21 luglio 2010 : 11:18:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Patrizio  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Patrizio Invia a Patrizio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non centra nulla il trascritto, prova a cercare questa metodica, credo sia l unico modo per vedere se c'e' stata l integrazione, un altro metodo potrebbe essere quello di isolari i singoli cloni piastrarli in modo da far crescere colonie separatamente, quelle che resitono avranno integrato il plasmide ma ovviamente, impiegheresti pių tempo


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