Dubbi sulla scelta degli Ab per Western

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sgrencino
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18 Messaggi

Inserito il - 01 ottobre 2010 : 10:49:05

Salve ragazzi, ho un dubbio, anzi, pi� di uno.
Per la scelta dell'anticorpo secondario, c'� una specie ospite preferibile alle altre?
L'Ab secondario oltre alla specificit� della specie deve essere diretto contro la famiglia delle Ig specifica?
D� migliori risultati la perossidasi o la fosfatasi?
Ringrazio anticipamente per le risposte.

_pietro_
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Citt�: Lund

104 Messaggi

Inserito il - 01 ottobre 2010 : 11:28:53

1) Se un anticorpo e' buono, e' buono che sia anti-rabbit, anti-goat ecc. Anche se nella mia limitata esperienza mi sono trovato molto meglio con anti-rabbit, mouse e chicken. Meno bene con anti-rat e goat, am puo' essere benissimo che io non usi determinate precauzioni indispensabili (o consigliate) per questi tipi di Ab o che i miei secondari non siano eccellenti.

2) Devi ovviamente scegliere un anticorpo specifico. Se il tuo primario e' una IgY devi usare un anti IgY. Non credo che faccia una grossa differenza nei sottogruppi

3) Non posso risponderti perche' non ho mai usato Ab coniugati con fosfatasi alcalina

sgrencino
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18 Messaggi

Inserito il - 01 ottobre 2010 : 11:58:02

Grazie per la risposta, ma se ho un primario mouse IgG, posso utilizzareun Ab secondario anti mouse IgM?

_pietro_
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Citt�: Lund

104 Messaggi

Inserito il - 01 ottobre 2010 : 13:07:38

Direi di no, ti sei risposto da solo. Se e' anti IgM riconoscera' solo IgM ;)