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Eppendorfina
Nuovo Arrivato
22 Messaggi |
 Inserito il - 13 ottobre 2010 : 12:13:19
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Salve ragazzi ho assolutamente bisogno che qualcuno mi illumini d'immenso su questo protocollo:
Seeds are homogenized in 5 VOLUMES of cold grinding buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.5, 0.4 M sucrose and 0.5 M NaCL.
Qualcuno mi sa dire come si calcolano questi benedetti 5 Volumi???????
Grazie mille!
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polval
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 14 ottobre 2010 : 15:11:16
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Secondo me devi calcolare il volume di ciò che devi omogenizzare e preparare una soluzione come è descritta con un volume finale 5 volte superiore al tuo di partenza. Mi sono spiegata???  |
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Eppendorfina
Nuovo Arrivato
22 Messaggi |
Inserito il - 14 ottobre 2010 : 16:01:27
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quindi se, per esempio, dovessi usare 10 ml 50mM TrisHCl, 0.4 M saccarosio e 0.5M NaCl diventerebbero 50ml però la concentrazione sarebbe sempre 50mM TrisHCl, 0.4M saccarosio ecc? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 15 ottobre 2010 : 11:38:09
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Devi vedere quanto volume occupano i tuoi semi e divi mettere 5 volumi (5 volte rispetto al volume del campione) di buffer.
Quindi se i tuoi semi occupano un volume di 10ml dovrai utilizzare 50ml di buffer.
Il buffer lo prepari sempre alla concentrazione che ti viene detta: (50 mM Tris-HCl pH 7.5, 0.4 M sucrose and 0.5 M NaCl) e ne prendi la quantità indicata, 5 volumi in questo caso! Quindi ad es. te ne prapari 100ml alla concentrazione indicata e ne usi 50ml.
I "volumi" sono una misura molto utilizzata e si riferiscono sempre a quello che hai prima, quindi se hai un certo campione con un certo volume metti X volumi (cioè X volte tanto) della soluzione. |
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Eppendorfina
Nuovo Arrivato
22 Messaggi |
Inserito il - 15 ottobre 2010 : 13:31:01
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| ok! ora ci sono!grazie mille, io i volumi manco li conoscevo! |
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Eppendorfina
Nuovo Arrivato
22 Messaggi |
Inserito il - 15 ottobre 2010 : 13:32:27
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| mi sta solo sorgendo un dubbio come calcolo i volumi dei semi?? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 15 ottobre 2010 : 14:18:19
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| Beh se non hai niente che ti metta in relazione il peso con il volume l'unico modo è quello di prendere i tuoi semi metterli in una provetta adeguata e vedere fisicamente quanto volume occupano. Anche se non è una misura precisissima, ma l'importante è che metti abbastanza eccesso di buffer, quindi "indicativamente" 5 volumi. |
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
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