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giulella
Nuovo Arrivato
38 Messaggi |
 Inserito il - 26 novembre 2010 : 15:06:56
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Cari colleghi,
pensate che ci sia una correlazione tra concentrazione di latte e tempo di incubazione per il bloccaggio?
Di solito io uso il 5% di latte per 2h30'a RT. Pensate che se riduco il tempo di incubazione dovrei incrementare la concentrazione di latte e viceversa?
Grazie mille
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_pietro_
Nuovo Arrivato
Città: Lund
104 Messaggi |
Inserito il - 26 novembre 2010 : 16:41:31
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| Io blocco per solo 2h alle tue stesse condizioni. E sono anche abbastanza sicuro che se dovessi ridurre ulteriormente non cambierebbe molto... |
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Daria85
Utente
678 Messaggi |
Inserito il - 26 novembre 2010 : 20:52:13
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quoto Pietro!
io faccio in 2 modi: o blocco 2h RT o o.n. a 4°C, ovviamente mantenendo sempre il latte al 5%.
baci |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 27 novembre 2010 : 14:25:06
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| io in genere blocco in bsa o in milk per 45'...se non ho tempo di proseguire lascio il blocco ON a 4°C |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 27 novembre 2010 : 19:08:01
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Se la lastra ti viene sporca non prendertela con il latte, se aumenti la conc. ci puoi fare una zuppa o un cappuccio nulla di più !!! 
Prova a diluire l'ab1 o l'ab2, o a caricare meno proteina. Può accadere anche se corri il gel troppo forte (si riscalda la cameretta) potresti fare la corsa e il blot in camera fredda. Moto spesso è dovuto ad anticorpi scadenti
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 27 novembre 2010 : 19:45:00
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| Dubito che la concentrazione abbia un effetto (almeno sopra un certo limite). Sicuramente sei ben oltre il limite di saturazione. |
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