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smile105
Nuovo Arrivato
Città: Napoli
29 Messaggi |
 Inserito il - 10 dicembre 2010 : 18:02:40
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Salve a tutti!
Qualche giorno fa ho fatto un esperimento di immunoprecipitazione con un anticorpo e poi rivelato mediante WB con un altro...La proteina di mio interesse però è di 50 KDa, quindi allo stesso peso delle IgG! Per questo motivo non sono riuscita a vedere il segnale che mi interessava!
Esiste un modo per eliminare le IgG?
Grazie mille!
Giusy
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2010 : 19:02:31
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| una IgG non ridotta e' 150kd |
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smile105
Nuovo Arrivato
Città: Napoli
29 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2010 : 20:09:25
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| In che senso non ridotta? |
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2010 : 22:25:29
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se fai correre il gel in condizioni non riducenti, altrimenti dividi le catene leggere (25kd) da quelle pesanti (50kd).
Anyway, non mi e' chiaro perche'cosa vedi/non vedi in WB. |
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smile105
Nuovo Arrivato
Città: Napoli
29 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2010 : 23:27:34
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| Infatti ho fatto la corsa in condizioni denaturanti!!! |
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2010 : 23:54:44
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continuo a non capire perche' la presenza dell'heavy chain dovrebbe darti problemi in WB.
in sds-page sei sempre in condizioni denaturanti, ma non per forza riducenti. |
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
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IgG Immunoprecipitazione
Didattica e Relazioni
