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Cantatore Santina
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 10 gennaio 2011 : 13:00:59

Ciao, mi chiamo Santina. Sono un tecnico di laboratorio in servizio presso un laboratorio di medicina legale.
Sono alle prese con la tecnica del WB. Vorrei che qualcuno mi aiutasse: Il sovranatante con le mie proteine, posso congelarlo? e poi posso riutilizzarlo per farlo correre nel gel? Ma devo ricentrifugarlo? Devo aggiungere nuovamente l'inibitore di proteasi?
Grazie

Daria85
Utente

678 Messaggi

Inserito il - 11 gennaio 2011 : 12:31:21

dopo che hai ottenuto il lisato cellulare dal tuo campione cellulare, lo puoi tranquillamente congelare ( a -20 o meglio a -80). ancora meglio se, ovviamente dopo aver dosato il lisato, congeli delle aliquote gi� pronte per esser caricate, ossia a concentrazione nota e gi� bolliti insieme al TB, poich� contiene il B-mercaptetanolo che mentiene le proteine linearizzate e quindi pi� "stabili".

ciao

prezzemolina
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 14 gennaio 2011 : 16:10:25

Ciao a tutti, � la prima volta che scrivo in questo forum ma avrei bisogno di sapere se qualcuno ha esperienze di wb per NFAT su estratto linfocitario!

Cantatore Santina
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 14 gennaio 2011 : 21:33:01

Cara Daria
Grazie mille per la tua risposta. Ritengo sia molto valida

Daria85
Utente

678 Messaggi

Inserito il - 16 gennaio 2011 : 13:40:24

figurati! :)

ciao