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Autore

Discussione

prandoFDA
Nuovo Arrivato

Prov.: Brescia
Citt�: Botticino

17 Messaggi

Inserito il - 22 ottobre 2006 : 12:43:50

saluti a tutti quanti

nella sezione apposita non ho trovato nulla ma mi domandavo lo stesso se per caso qualcuno di voi conoscesse un protocollo per la transfezione di un plasmide in cellule endoteliali umane

...la transfezione pu� tranquillamente essere transiente e le cellule bersaglio basta che siano di mammifero...poi al max ci si gioca su

le tecniche sono molte (transfezione con il calcio fosfato, la transfezione liposoma-mediata) da escludere quella per via virale/batterica

ne avete mai usate? cosa mi consigliate?

life happens

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 22 ottobre 2006 : 14:52:49

Io ho utilizzato la Lipofectamine 2000 per transfettare una linea di cellule umane e mi sono trovata bene

questi sono i link:

https://catalog.invitrogen.com/index.cfm?fuseaction=viewCatalog.viewProductDetails&productDescription=106
http://www.invitrogen.com/content/sfs/manuals/lipofectamine2000_man.pdf
http://www.invitrogen.com/Content/SFS/ProductNotes/F_060926_Lipofectamine%202000.pdf

prandoFDA
Nuovo Arrivato

Prov.: Brescia
Citt�: Botticino

17 Messaggi

Inserito il - 22 ottobre 2006 : 20:13:53

grazie....

e per curiosit� che cell hai transfettato?

life happens

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 23 ottobre 2006 : 12:06:54

Podociti! Sono cellule un po' particolari!

valeriamassa
Nuovo Arrivato

Prov.: Milano
Citt�: milano

64 Messaggi

Inserito il - 28 ottobre 2006 : 17:30:04

Invece io volevo sapere se qualcuno ha esperienza di trasfezioni di plasmidi in fibroblasti umani, io ho provato a farlo senza prima immortalizzarli ed � stato disastroso!! Sono morte tutte!! Qualcuno sa consigliarmi a proposito??

valeria