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°silvia°
Nuovo Arrivato
Prov.: Genova
Città: genova
100 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 09:30:11
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Ciao...
Di gel ne ho fatti parecchi però sempre sotto indicazioni di altri "ne voglio uno all'11, uno al 12 e bla bla bla" ma non ho ancora ben capito che concentrazioni uso per separare una det. proteina.
In base al peso molecolare aumento o diminuisco la concentrazione ma c'è una tabella che mi dica i valori della concentrazione per peso di proteina?
Lo stesso discorso vale per i Gel a DNA. Concentrazione diversa a seconda del genoma...
consigli? grazie
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°silvia°
Nuovo Arrivato
Prov.: Genova
Città: genova
100 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 09:33:11
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Scusaaaate! ho sbagliato sezione! qualcuno può spostarmi nelle tecniche? grazie!
(e magari eliminare questo secondo messaggio)
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 11:53:43
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Ciao Silvia, io intanto ti rispondo qui!
Tieni sempre presente questo: se aumenti la concentrazione le maglie del gel sono più strette e quindi i frammenti più grandi fanno più fatica a passare (migrano più lentamente!).
Detto questo si capisce perchè per visualizzare meglio bande piccole utilizzi gel a concentrazioni maggiori (se la concentrazione è inferiore le bande più piccole possono anche migrare fuori dal gel!) mentre per visualizzare bande a PM superiore usi gel a concentrazioni basse (altrimenti non migrano ma rimangono tutte all'inizio del gel!)
Questo è un esempio per quanto riguarda i gel di agarosio per il DNA:
% Agarosio -- bp DNA
0,3% ------ 60.000 - 5.000 0,6% ------ 20.000 - 1.000 0,7% ------ 10.000 - 800 0,9% ------ 7.000 - 500 1,2% ------ 6.000 - 400 1,5% ------ 4.000 - 200 2,0% ------ 3.000 - 100
Questa invece è un'immagine di gel di poliacrylamide a diverse concentrazioni:
Immagine:
14,73 KB
Silvia |
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atreliu
Amministratore
Prov.: Milano
Città: Milano
2484 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 12:53:12
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Discussione spostata. Bel contributo Silvia (e bellissime le img)
Riccardo |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 18:58:35
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Citazione: Messaggio inserito da atreliu
Discussione spostata. Bel contributo Silvia (e bellissime le img)
Riccardo
Dici a me Riki?... Grazie |
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°silvia°
Nuovo Arrivato
Prov.: Genova
Città: genova
100 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 21:05:15
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già.... non penso si riferisse a me!
Grazie GFPina! |
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°silvia°
Nuovo Arrivato
Prov.: Genova
Città: genova
100 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2006 : 21:08:13
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ah.. domandina(idiota) i pesi molecolari nella figura del gel sono espressi in Da o KDa? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 24 ottobre 2006 : 00:35:52
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KDa! e per la precisione (non per fare pubblicità) sono le bande di uno standard Bio-Rad. Avevo trovato l'immagine qualche tempo fa in internet! |
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°silvia°
Nuovo Arrivato
Prov.: Genova
Città: genova
100 Messaggi |
Inserito il - 24 ottobre 2006 : 11:17:07
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grazie!
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