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iac
Nuovo Arrivato
49 Messaggi |
 Inserito il - 20 maggio 2011 : 10:37:11
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Salve.Risulta opportuno registrare alcuni parametri mentre si fa un gel di agarosio?Anche se non è ondamentale dopo 20 minuti di gelificazione verso sopra il gel un poco di TBE 1x, per evitare che secchi troppo.Fatemi sapere grazie
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elly_
Utente Junior
400 Messaggi |
Inserito il - 20 maggio 2011 : 19:46:40
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| io non ho capito la domanda! |
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Pipps
Utente Junior
244 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2011 : 10:12:18
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| se devi portarlo a volume, e magari con acqua, ti consiglio di farlo subito. Poi prima che solidifichi aggiungi l'intercalante del dna e metti nel lettino, e quindi aspetti che solidifichi. Versare sopra TBE1x, personalmente, nn l'ho mai sentito. |
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iac
Nuovo Arrivato
49 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2011 : 11:34:16
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Citazione:
Messaggio inserito da iac
Salve.Risulta opportuno registrare alcuni parametri mentre si fa un gel di agarosio?Anche se non è ondamentale dopo 20 minuti di gelificazione verso sopra il gel un poco di TBE 1x, per evitare che secchi troppo.Fatemi sapere grazie
Scusate ma ho riletto la domanda che ho postato, mi sono reso conto che è incomprensibile.La domanda è
Quando faccio geliificare un gel di agarosio, aggiungo una nota quantità di Sybergreen.Mentre si fa ciò bisogna registrare alcuni parametri chimico-fisici ambientali ?come ad esempio temperatuta, pH, intenhsità luminosa ecc...?Grazie |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2011 : 11:40:06
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| Non ho mai fatto gel con SYBR Green, ma con l'EtBr non ho mai registrato nulla... coli l'agarosio nel supporto del gel e lo lasci lì a gelificare. Non credo che sia necessario versare il TBE, a meno che tu non lo voglia lasciare lì dei giorni... |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2011 : 12:20:16
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| Con SYBRGreen é esattamente identico che con EtBr, non devi registrare alcun parametro ambientale. Sarebbe meglio lasciar solidificare il gel sotto cappa, in realtà anche con SYBRGreen perché sarà pur vero che é meno tossico dell'etidio ma é pur sempre un intercalante del DNA. Se lo lasci troppo sotto cappa quindi poterebbe seccarsi troppo, in quel caso, solo dopo che si é abbastanza solidificato puoi metterci sopra un velo di TBE. In genere non si fa comunque, mi é capitato di farlo solo se doveo fare altro e abbandonare lì il gel per molto tempo. Se invece non pensi di utilizzarlo subito, ma ad es. lo vuoi utilizzare il giorno dopo basta che lo avvolgi nella pellicola trasparente e lo metti in frigorifero. |
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iac
Nuovo Arrivato
49 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2011 : 16:58:17
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grazie
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Gel di agarosio
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