salve ragazzi! mi servirebbe qualcuno che gentilmente mi saprebbe dare delle informazioni riguardo le tecniche RIA ed ELISA. che cosa cosa sono , differenze etc, etc, in modo semplice e chiaro. Ve ne sarei molto molto grato .
Ciao!sono due tecniche immunologiche basate quindi sul legame antigene(Ag) e anticorpo(Ab)sfruttate in diagnostica e nella ricerca per ricercare antigeni o anticorpi(es.antigeni virali o Ab prodotti contro un antigene virale).In relatà possono essere sfruttae anche per dosaggi ormonali,diagnostica batteriologica,ricerca di autoanticorpi nelle malattie autoimmunitarie ecc..).
Molto schematicamente posso descrivertele così: Immagina di avere adeso alla piastra un Ag e che tu voglia cercare nel siero del paziente Ab diretti contro questo antigene,allora non dovrai fare altro che aggiungere al pozzetto della piastar il siero.. Possono avvenire due cose: 1- Ag + Ab ------> Ag-Ab in questo caso l' Ab si è legato all'antigene e quindi nelk siero del paziente c'era quell'anticorpo! 2-Nel secondo caso non avviene alcuna reazione..l'Ab non c'è! Ora..aggiungiamo al primo caso un secondo Ab,ad esempio un Ab anti Ig umane..poichè la sua specificità è diretta contro l'anticorpo legato della prima reazione avverrà:
Ag-Ab + Ab anti Ig umana-------------> Ag-Ab-Ab
Si forma un bel immunocomplesso insomma!! L'anticorpo che abbiamo aggiunto ha però una caratteristica:è marcato!Questo vuol dire che il suo legamee può essere evidenziato come: 1.nell'ELISA è marcato da un enzima(insomma attaccato all'Ab c'è un enzima).Quindi aggiungendo il substrato dell'enzima questo lo metabolizzerà producendo un composto colorato! 2-nel RIA l'anticorpo è invece marcato radioattivamente! La marcatura quindi ci consente di scoprire se nel siero del paziente era presente o no l'anticorpo che ci interessa!
In realtà nel RIA non è proprio così..poichè si sfruttava(ora il RIA è poco usato per ovvi motivi!!)un meccanismo di competizione che avveniva tra un Ab marcato e uno non marcato che competitevano(si dice cosi?!?!)per uno stesso Ag..
Spero di essere stato chiaro..comunque se serve qui!