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Roberto De Masi
Nuovo Arrivato
Prov.: Italy/Lecce/Puglia
Città: Casarano
4 Messaggi |
Inserito il - 02 novembre 2011 : 09:45:40
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Ciao a tutti torno ad esporre un quesito: quando estraggo i PBMC (la solita centrifug su ficol) spesso mi viene contaminazione con eritrociti. So che per mecc osmatico li si potrebbe lisare con la semplice ddH2O, ma non ho idea dei tempi di incubaz. AIUTATEMI! mille grazie.
Roberto
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Dionysos
Moderatore
  

Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 03 novembre 2011 : 12:58:24
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PBMC umani o murini? il tempo è diverso! |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà (F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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memole
Utente Junior


Prov.: Brindisi
Città: brindisi
577 Messaggi |
Inserito il - 15 novembre 2011 : 11:01:44
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Se parli di umani puoi provare a lisare le emazie con una soluzione di NH4Cl 0,4% (w/v) pH 7.4 preparata in Tris HCl 50 mM per 10 minuti. Io facevo così, ma se puoi evitala perchè comunque ti stressa le cellule.
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Daria85
Utente
 

678 Messaggi |
Inserito il - 15 novembre 2011 : 11:20:57
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io faccio semplicemente una lisi di 1min cn 1ml ddH2O, spipettando molto lentamente. finito il minuto metto PBS e centrifugo. ciao |
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