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Autore

Discussione

winnyyy
Nuovo Arrivato

Prov.: Salerno
Citt�: Salerno

7 Messaggi

Inserito il - 16 febbraio 2012 : 16:58:48

Ciao ragazzi,
mi trovo in un incredibile dilemma con l'ECL (io uso il Millipore HRP substrate) ! Sebbene riesca ad ottenere dei discreti trasferimenti ( valutato con il Rosso Poinceau) al termine del mio esperimento di blotting mi compaiono zone del filtro non sviluppate imputabili all'ECL !!! Le mie domande sono :
Quanto ECL usate a gel ?? (io 1 ml.. quando lo espongo al liquido capovolto);
Avete metodi migliori per effettuare l'ECL (anche con il lato volto alle proteine verso l'alto) ?
Vi ringrazio anticipatamente !!!
Un abbraccio,
Vincenzo

Iside
Utente Attivo

Citt�: Napoli

1375 Messaggi

Inserito il - 16 febbraio 2012 : 17:04:32

io uso in quantit� sufficienti a coprire la membrana, con le proteine rivolte verso l'alto.

...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...

aladinale
Nuovo Arrivato

36 Messaggi

Inserito il - 16 febbraio 2012 : 17:06:16

Hi Vincenzo,

devi assicurarti che la membrana sia interamente ricoperta dall'ECL (si pu� usare up to 2mL)

BW,
Ale

winnyyy
Nuovo Arrivato

Prov.: Salerno
Citt�: Salerno

7 Messaggi

Inserito il - 16 febbraio 2012 : 17:14:27

perfetto !!! Di seguito esponete il filtro asciutto ?
grazie mille ragazzi :)

MariaR
Nuovo Arrivato

Prov.: BN
Citt�: Benevento

50 Messaggi

Inserito il - 17 febbraio 2012 : 01:04:09

Ciao...il filtro lo metto su pellicola trasparente distesa bene sul banco. Per filtro almeno 2mL e con le proteine verso l'alto. E sto ben attenta guardando controluce che tutte le zone del filtro sono coperte da ECL. Passato un minuto (se � ECL normale) asciugo il filtro passando carta 3MM e subito dopo lo posiziono nella cassetta. Alcune volte nel minuto di attesa copro il filtro con una cassetta scura.