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joleee80
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Prov.: Napoli
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24 Messaggi |
 Inserito il - 10 gennaio 2007 : 18:32:33
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Ciao a tutti......qualcuno mi può aiutare????
Devo preparare una soluzione di BSA (bovine serum albumin)1mg/ml....per fare una retta di taratura per la determinazione della concentrazione dei miei campioni:
Si scioglie in acqua?
E dopo aver fatto la soluzione bisogna leggerla allo spettrofotometro per aggiustare la concentrazione usando la legge di Lambert-Beer??
Qualcono sa quale è il coefficiente di estinzione molare per la BSA??
Oppure se qualcuno mi può indicare il proprio protocollo....
Davvero Grazie
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Ciò che mi nutre .......mi distrugge.... |
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RM
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115 Messaggi |
 Inserito il - 10 gennaio 2007 : 21:21:54
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Io usavo questo protocollo
- sciogliere 5 mg BSA in 10 mL dH2O
- leggere allo spec in couvette di quarzo a 280 e 260 nM
- Calcolare la [BSA] con questa formula:
[BSA](mg/mL) = (A280 X 1.55) - (A260 X 0.76)
Partendo da una soluzione di BSA 0.5 mg/mL la conc dovrebbe essere circa 0.324 mg/mL. Comunque per averla 1 mg/mL si possono scalare le quantità.
Ciao |
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chick80
Moderatore
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11491 Messaggi |
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joleee80
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
24 Messaggi |
Inserito il - 10 gennaio 2007 : 22:05:54
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Ti ringrazioooo... |
Ciò che mi nutre .......mi distrugge.... |
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joleee80
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
24 Messaggi |
Inserito il - 10 gennaio 2007 : 22:07:36
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Grazie RM.....
Ma se parto da 1mg/ml la formula non cambia vero??
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RM
Nuovo Arrivato
115 Messaggi |
Inserito il - 10 gennaio 2007 : 22:48:18
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no...ma teoricamente per avere una conc finale di 1mg/mL dovresti partire da circa 1,5 mg/mL. Ovviamente non è importante il valore assoluto della concentrazione quanto avere una concentrazione nota. Puoi partire sciogliendo quantità + alte e poi una volta letta la conc., diluire a 1 mg/mL.
Ciao |
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BSA.....
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