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serena.89
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43 Messaggi |
 Inserito il - 07 luglio 2012 : 17:17:26
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Salve, ho capito tutti i passaggi del Plasmide rescue, fino a quando si ottiene l'amplificazione del solo frammento che ha l'ori e la resistenza all'antibiotico. Questo frammento contiene, oltre a parte del vettore anche una regione che rappresenta il Dna genomico a monte, quindi possiamo usarlo come sonda per identificare le regioni fiancheggianti a quelle in cui il frammento si era inserito.
Per ottenere le regioni fiancheggianti senza fare PCR inverse e Nested PCR, come si fa? Si dovrebbe far ibridare questa sonda in una genoteca e poi? Cmq la genoteca contiene dei frammenti clonati in plasmidi quindi prima si dovrebbero digerire i plasmidi per ottenere solo i frammenti e poi denaturarli? Mi fermo qui perchè probabilmente sto inventando le cose :) correggetemi
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Plasmide rescue
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