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 MSAP PCR URGENTE!!
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laura85
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106 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2007 : 20:27:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di laura85 Invia a laura85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti ragazzi!
sti studiando la MSAP PCR e + o meno l'ho capita ma vi faccio una domanda...
essa si basa sull'uso di enzimi di restrizone sensibili alla metilazione delle citosine...ma quetso cosa significa?
nel senso che gli enzimi di restrizione che uso per tagliare tagliano il dna metilato oppure no?
apsetto una risposta
vio prego aiutatemi..l'esame è tra poco e in internet non trovo info...
grazie a tutti
kiss kiss

laura85
Nuovo Arrivato




106 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2007 : 21:04:19  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di laura85 Invia a laura85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
questa tecnoca prevede l'uso di enzimi sensibili alla metilazione per fare un confronto tra due dna e vedere quello wt e quello tumorale...secondo me a questo punto dipende dal enzima che uso...
se uso un enzima che riconosce siti metilati e li taglia allora avrò che quello è un dna tumorale...se uso un enzima che non li taglia e su gel ho una sola banda allora sarà quello il tumorale

può essere cosi?
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2007 : 23:28:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Identification and characterization of differentially methylated regions of genomic DNA by methylation-sensitive arbitrarily primed PCR.

questo è l'articolo che descrive la tecnica.

In questo lavoro usano un enzima chiamato HpaII che NON taglia il DNA se è metilato, e un altro che taglia lo stesso sito sempre, indipendentemente dallo stato di metilazione.
In questo modo ottieni due fingerprint diversi se il DNA è metilato o meno.

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