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Autore

Discussione

tweety
Nuovo Arrivato

Citt�: pescara-chieti

10 Messaggi

Inserito il - 05 febbraio 2007 : 10:01:37

ciao a tutti,avrei bisogno di un aiuto con una domanda x l'esame di biochimica app.ta x ctf.
la domanda � questa:"descrivere come trattare i campioni da utilizzare in sds-page."
� sufficiente dire che sds denatura le proteine e che conferisce a tutte carica negativa?
grazie mille

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 05 febbraio 2007 : 11:41:24

Ciao, aggiungerei anche che ai campioni si aggiunge beta-mercaptoetanolo che riduce i ponti disolfuro. Inoltre vengono bolliti brevemente prima di caricarli sul gel per facilitare la denaturazione delle proteine.

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drophy
Nuovo Arrivato

Prov.: lecce
Citt�: copertino

11 Messaggi

Inserito il - 05 febbraio 2007 : 17:39:39

Ciao!...proprio per essere pignoli...ci aggiungi anche qualche granello di blu di bromofenolo che ti permette di seguire visivamente la corsa elettroforetica delle proteine.

Patrizio
Moderatore

Citt�: Barcellona

1914 Messaggi

Inserito il - 05 febbraio 2007 : 17:50:27

e se proprio la dobbiamo dire tutta il beta-mercaptoetanolo puzza, i laboratori ricchi usano un altro riducente ....ora pero' non mi viene il nome

Anyra
Utente Junior

Prov.: Pesaro-Urbino
Citt�: Saltara

212 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2007 : 09:46:07

E pignoli per pignoli aggiungiamo anche una soluzione tampone fatta di Tris.HCl ph 6.8 che favorisce l'allineamento delle proteine nello stackng. ed anche un poco di glicerolo che rende pi� densa la soluzione ed evita che i campioni vaghino nel tampone da corsa ma rimagano nel pozzetto dove sono stati caricati.

Sample buffer 2X

Tris-HCL 0.5 M pH 6.8 10 ml
SDS 2%
Glicerolo 20%

H2O fino a 50 ml
Blu di bronmofenolo q b

Ciao

Il mio Cavaliere
http://s4.battleknight.it/index.php?loc=hire&ref=OTA3NTAw

Patrizio
Moderatore

Citt�: Barcellona

1914 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2007 : 17:19:29

Trovati:
DTT - DiTioTreitolo (in alternativa il DTE - DiTioEritritolo)... e del B-beta-mercaptoetanolo
Agenti riducenti,necessari per rompere i ponti disolfuro S-S e mantenere in forma ridotta le proteine

tweety
Nuovo Arrivato

Citt�: pescara-chieti

10 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2007 : 21:15:40

grazie mille,gentilissimi!!!!