determinazione concentrazione proteica

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Lck3
Nuovo Arrivato

30 Messaggi

Inserito il - 14 febbraio 2013 : 00:39:17

Ciao a tutti,
ho un dubbio.

Ieri avevo un campione proteico in 100 uL.

Volevo sapere la concentrazione del campione , quindi ho preparato la cuvetta per lo spettrofotometro , con :

800 uL di H20 + 200 uL Biorad ( x determinaz. proteica) e ho aggiunto 10 uL di campione proteico.

Ora , non capisco...

lo spettrofotometro mi da lettula ( OD595) uguale a 0.200.
Arriva il mio prof e mi dice che 0.200 corrispondono a 0.2 mg/mL....

e qua mi perdo....

sapete il perch�?

non vi scrivo tutto il ragionamento del prof... perch� tanto non l'ho capito....

help me please

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 14 febbraio 2013 : 06:28:24

Avevi fatto una curva standard immagino?

Ad ogni modo la curva standard "tipica" per l'assay della Biorad (che � la marca, non il nome del reagente) � questa

Probabilmente il tuo prof stava semplicemente approssimando.

PS: volendo fare le cose pi� precise la prossima volta fai una curva standard e rapportati a quella. E soprattutto metti 790ul di H20 se vuoi arrivare a 1ml!

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