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Vincent2up
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 15 maggio 2013 : 18:34:18
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Salve a tutti volevo avere delucidazioni sul saggio del doppio ibrido sapendo che la proteina 1(esca) interagisce con la proteina 2.come faccio a sapere con esattezza qual'è la proteina 2?esiste un metodo?grazie.
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chick80
Moderatore
    

Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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Vincent2up
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 16 maggio 2013 : 12:23:45
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Scusami forse non sono stata chiara la mia prof afferma che il saggio del doppio ibrido ci consente di rispondere a 2 domande.la prima è la proteina a interagisce con la b?e la risposta è quella che hai dato tu cioè interagiscono quando si ha trascrizione....la seconda domanda è come faccio a capire con quali è quante proteine interagisce la proteina a?chi è la proteina b?grazie forse centrano le proteine di fusione |
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SpemannOrganizer
Utente
 

Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 16 maggio 2013 : 20:01:33
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Ma io direi che una volta che hai identificato le colonie LacZ + (che diventano blu in presenza di X-Gal, ma puoi avere un qualsiasi altro reporter al posto di LacZ) le isoli, estra il plasmide e sequenzi... |
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0barra1
Utente Senior
   

Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2013 : 11:16:24
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Citazione: Messaggio inserito da SpemannOrganizer
Ma io direi che una volta che hai identificato le colonie LacZ + (che diventano blu in presenza di X-Gal, ma puoi avere un qualsiasi altro reporter al posto di LacZ) le isoli, estra il plasmide e sequenzi...
Son d'accordo con Spemann, credo l'utente si riferisca ad uno screening di librerie di cDNA tramite doppio ibrido. Nel caso le sequenze ai lati del cDNA sono note, per cui un sequenziamento puo' rapidamente far luce sull'identità dell'interattore.
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So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today. A Universe From Nothing, Lawrence Krauss
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