Quanto è utile/interessante questa discussione:
| Autore |
Discussione |
|
|
roselady
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
119 Messaggi |
 Inserito il - 11 giugno 2013 : 20:04:16
|
Ciao ragazzi,scusatemi avrei bisogno di una info .
Devo fare un saggio Elisa per il quale devo utilizzare un anticorpo primario che,secondo il protocollo Elisa,va diluito 1:1000. Oggi me ne è arrivato uno nuovo di una marca diversa che,mi hanno detto,va diluito 1:5000 solitamente. Questa nuova diluizione va bene anche per l'Elisa,o in ogni caso devo rispettare la diluizione 1:1000 da protocollo?
Se lo diluissi 1:1000 come faccio normalmente,che potrebbe succedere a livello di esperimento?
Si tratta di un Elisa in cui si piastrano cellule con una proteina che riconosce un particolare recettore sulla superficie cellulare,e questo anticorpo primario già coniugato va a riconoscere la proteina in questione,in modo da saggiare la sua affinità per le cellule .
Grazie mille :)
|
|
|
|
|
chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 11 giugno 2013 : 21:39:06
|
Le diluizioni degli anticorpi sono sempre date come suggerimento, e sono sempre e comunque da ottimizzare caso per caso.
Se cambi anticorpo ti conviene fare una piastra con dei controlli positivi e usare diverse concentrazioni dell'anticorpo (es. 1:20000, 1:10000, 1:5000, 1:2000, 1:1000, 1:500) per determinare quella ottimale.
Se metti troppo anticorpo rischi di avere campioni saturati e di uscire dal range di linearità dell'ELISA |
Sei un nuovo arrivato?
Leggi il regolamento del forum e presentati qui
My photo portfolio (now on G+!) |
 |
|
|
roselady
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
119 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2013 : 17:36:17
|
| Va bene ti ringrazio,quindi così non mi sai dare una risposta sicura,devo fare delle prove... grazie mille :) |
|
|
|
chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2013 : 17:57:29
|
| In generale sì. Meglio perdere una giornata per fare una prova piuttosto che buttare via dei campioni o avere dei risultati falsati perchè hai usato la quantità sbagliata di anticorpo! |
Sei un nuovo arrivato?
Leggi il regolamento del forum e presentati qui
My photo portfolio (now on G+!) |
|
|
| |
Discussione |
|
|
|
Quanto è utile/interessante questa discussione:
| MolecularLab.it |
© 2003-18 MolecularLab.it |
|
|
|
Elisa
Didattica e Relazioni
