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Luss1908
Nuovo Arrivato
49 Messaggi |
 Inserito il - 30 novembre 2013 : 20:04:23
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Ciao! Ho realizzato una retta di taratura usando soluzioni a concentrazione nota. Ho messo 150 microl di ciascuna soluzione nei pozzetti di una piastra, dopodichè ho letto i valori di assorbanza e ho fatto il grafico. La retta di taratura serviva per determinare la concentrazione di 3 campioni. Il problema è che di questi campioni non ho usato 150 microl ma, per errore, ho prelevato 250 microl e ho fatto la lettura dell'assorbanza. Mi stavo chiedendo quindi come faccio a determinare la concentrazione dei campioni, dato che per fare la retta di taratura ho prelevato 150 microl di ciascuna soluzione a concentazione nota, mentre per i campioni ne ho presi 250? Essendo diversi i volumi cambia l'altezza della soluzione nel pozzetto e di conseguenza il cammino ottico, quindi i valori di assorbanza che ho trovato per i campioni non posso usarli per fare l'interpolazione con la retta di taratura, giusto? L'assorbanza che ho ottenuto per i campioni è in realtà più alta di quella che avrei dovuto ottenere perchè il cammino ottico,usando 250 microl, è maggiore di quello determinato da 150 microl. Spero di aver espresso bene il mio dubbio :)
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2013 : 10:28:30
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Guarda, secondo me la cosa migliore è rifare l'esperimento.
Se ciò non fosse possibile (es. non hai più i campioni) allora potresti fare una piastra con una retta di taratura con 150ul e una con 250ul o ancor meglio 2 o 3 rette di taratura (non duplicati!) per condizione. Dopodichè puoi trovare un fattore di correzione che puoi applicare ai tuoi campioni.
Io comunque poi rifarei l'esperimento, soprattutto se ti interessano i valori assoluti di concentrazione. D'altro canto, se quello che ti interessa sono le percentuali relative tra i vari campioni il problema è meno grave. |
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Luss1908
Nuovo Arrivato
49 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2013 : 19:19:33
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| I campioni dovrebbero esserci ancora, domani rifaccio la lettura :) Grazie mille ;) |
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