problema estrazione RNA da cellule con Trizol

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sam88
Nuovo Arrivato

10 Messaggi

Inserito il - 11 giugno 2014 : 16:28:59

Ciao a tutti! ho da un po' un problema che mi si ripresenta molto spesso e non riesco a capire il perch�: durante l'estrazione dell'RNA con il trizol molte volte capita che il pellet dell'RNA non si viene a formare e riesco ad ottenere pochissimo RNA (meno di un ug totale), nonostante parta da una piastrina da 35mm con le cellule a confluenza.
A qualcuno � gi� capitato???sapreste darmi un consiglio??
grazie a tutti!!!!!

Neuroscience
Utente

659 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2014 : 15:03:05

Prova ad usare pi� trizol per l'estrazione,
cerca di rompere le cellule con siringa o potter.

Dipende dal ceppo cellulare, alcune hanno pi� RNA, altre meno a parit� di confluenza e di piastra ovviamente

sam88
Nuovo Arrivato

10 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2014 : 16:27:25

per una piastrina da 35mm il procollo del Trizol prevede di usare 1ml, pu� essere che le cellule erano troppe e non si sono lisate bene.
Prover� a seguire il tuo consiglio!
ti ringrazio molto per la tua risposta!