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Autore

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lab89
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3 Messaggi

Inserito il - 08 ottobre 2014 : 17:32:34

Ciao a tutti,
devo amplificare il cDNA di un gene. Mi hanno dato i primers che si trovano all'inizio del 5' e alla fine del 3' del mio gene e quindi so anche la Tm dei primers. Ma mi chiedevo dato che amplificher� tutto il cDNA del mio gene, devo aumentare il tempo di annealing considerando che il cDNA del mio gene � lungo quasi 2000 bp?
Grazie

0barra1
Utente Senior

Citt�: Paris, VII�me arrondissement

3847 Messaggi

Inserito il - 08 ottobre 2014 : 17:45:10

Allungare rispetto a quale tempo?

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 08 ottobre 2014 : 19:04:21

Casomai devi aumentare l'extension, non l'annealing!
Il tempo dipende dall'enzima che utilizzi.

lab89
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 09 ottobre 2014 : 12:44:26

Scusate volevo scrivere extension!
L'enzima � una GoTaq che ho controllato che estende 1min/kb.
Grazie

midichloria
Nuovo Arrivato

75 Messaggi

Inserito il - 09 ottobre 2014 : 16:26:09

Quindi avendo 2kb=2 minuti :)