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RossaPonceau
Nuovo Arrivato



4 Messaggi
Inserito il - 22 gennaio 2016 : 23:23:50  Mostra Profilo Invia a RossaPonceau un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
volevo chiedervi che metodo usavate per quantizzare le proteine per western blot.Mi hanno suggerito di fare così. In pratica:
-si legge il valore dell' assorbanza
-si divide per 2 (suppongo i microlitri di campione nella cuvetta)
-si divide poi ulteriormente per 0.059 ( credo il valore dell'assorbanza del Bradford diviso per 10.000)
- il numero ottenuto si divide per i gamma di campione che vogliamo ottenere ottenendo così i microlitri
Mi chiedevo ma...Perchè si usa questo calcolo? Si rifà a qualche legge?
Grazieeee

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 24 gennaio 2016 : 13:08:40  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:

-si divide poi ulteriormente per 0.059 ( credo il valore dell'assorbanza del Bradford diviso per 10.000)

No...dovresti fare una retta di taratura con una proteina a concentrazione nota (di solito albumina), calcolare la formula della retta e grazie a quella ricavare la concentrazione dei tuoi campioni.
Chi ti ha suggerito così ha approssimato che la tua retta dia un valore di 0.059
Non so se possa esserti utile, ti allego il foglio di calcolo che uso io


Allegato: Calcoli.xls
16,21 KB
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
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