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Roberta Migliore
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2 Messaggi

Inserito il - 23 marzo 2018 : 19:14:36  Mostra Profilo Invia a Roberta Migliore un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti! scrivo perchè ho un dubbio sul saggio MTT.
I procedimenti:
Piastramento e incubazione 24 ore
Trattamento 24/48 ore
al termine del trattamento aspirare delicatamente il terreno di coltura, aggiungere terreno fresco, aggiungere al terreno soluzione di MTT (5 mg/ml MTT in PBS)in concentrazione pari a quella del terreno di coltura(?)e incubare 3 ore a 37 gradi
Al termine dell incubazione aspirare il terreno, fare un lavaggio in PBS e aggiungere DMSO, poi leggere a 570 nm.
é corretto?
Altri dubbi: la polvere di MTT si può sciogliere direttamente in terreno? il terreno rosso interferisce con la lettura? in tal caso come è possibile risolvere? Vi ringrazio in anticipo per eventuali risposte

sofychan
Nuovo Arrivato



101 Messaggi

Inserito il - 28 marzo 2018 : 08:40:27  Mostra Profilo Invia a sofychan un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non ho esperienza in MTT (noi facciamo sempre MTS), ma per l'ultima domanda direi che puoi usare tranquillamente medium without phenol red (e.g. DMEM). Noi per togliere eventuale interferenza facciamo cosi'.
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Roberta Migliore
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 29 marzo 2018 : 12:29:27  Mostra Profilo Invia a Roberta Migliore un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie mille per la risposta :)
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