Salve a tutti , Sono nuova del forum, e sono anche disperata [ :cry]. Qualcuno di voi ha mai avuto modo di marcare un antigene con HRP? per poi utilizzarlo in un ELISA a sandwich a doppio antigene?
Nel mio caso specifico ho un kit contenente HRP attivata con sulfo-SMCC, questo mi permette di di utilizzare 2 reagenti (due differenti metodi) per ottenere gruppi sulfidrile liberi sulla macromolecola di mio interesse che successivamente andrò a coniugare con HRP. Il kit in questione è "EZ-link maleimide activated HPR kit" della thermo scientific. CODE 31494 Qualcuno ha mai avuto modo di testarlo? Grazie a chi mi risponderà
Non ho esperienza con questo specifico kit ma se segui il loro protocollo (e i loro reagenti, condizioni particolari etc) non ho dubbi che le possibilità di fallimento siano alquanto basse. La descrizione (letta veloce) mi sembra diretta e la reazione classica. Mi assicurerei solo di avere i gruppi SH liberi per reagire col tuo HRP modificato