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katia74
Nuovo Arrivato
23 Messaggi |
 Inserito il - 10 maggio 2007 : 10:21:33
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ciao, sono Katia ...ho iniziato da poco a fare gel 2-d ..e ho già dei problemi.... dopo aver colorato con commassie mi vengono delle strisciate verticali bruttissime che coprono gli spot.........sapete aiutarmi? grazie 
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Biochica
Utente Junior
285 Messaggi |
Inserito il - 10 maggio 2007 : 11:09:35
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| sei sicura di non aver caricato troppo campione? |
Io non sono cattiva...è che mi disegnano così...
-Jessica Rabbit- |
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katia74
Nuovo Arrivato
23 Messaggi |
Inserito il - 10 maggio 2007 : 11:23:14
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| penso proprio di no.....ne ho caricati 100 microgrammi/microlitro....anzi pensavo fosse anche poco , uso strip da 7 cm... |
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Biochica
Utente Junior
285 Messaggi |
Inserito il - 10 maggio 2007 : 12:29:32
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| i 2d li ho solo visti fare...purtroppo...sono più esperta di monodimensionali, normalmente le strisciate dipendono da un eccesso di campione...o di un sacco di schifezze presenti nel campione... |
Io non sono cattiva...è che mi disegnano così...
-Jessica Rabbit- |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 10 maggio 2007 : 13:48:40
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neanche io sono espertissima di gel 2d, però come dice biochica penso che il campione sia troppo concentrato.
prova a caricarne meno e vedi come va la colorazione
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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Gabriele
Utente
Prov.: Pisa
Città: Pisa
615 Messaggi |
Inserito il - 10 maggio 2007 : 20:02:54
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| Non avrai sfondato i pozzetti del gel? |
"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe." |
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cuccurullom
Nuovo Arrivato
Città: napoli
14 Messaggi |
Inserito il - 11 maggio 2007 : 10:14:47
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Non credo sia un problema di quantità....E' possibile che il tuo campione sia sporco. Per esempio, se pensi che ci possa essere una contaminazione da acidi nucleici (che interferiscono nel 2D), prova a sonicare brevemente il tuo campione prima di caricarlo. tre cicli da dieci secondi dovrebbero aiutarti.
Buona Fortuna |
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Cangrande
Utente Junior
Prov.: Verona
280 Messaggi |
Inserito il - 19 maggio 2007 : 14:45:49
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Concordo con entrambe le ipotesi:
- troppo campione
- campione molto sporco
forse di più con la prima... |
Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala. |
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katia74
Nuovo Arrivato
23 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2007 : 10:14:26
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| grazie a tutti...proverò caricare meno campione.... |
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Bluthenthal
Nuovo Arrivato
Città: Melbourne
3 Messaggi |
Inserito il - 02 giugno 2007 : 09:50:50
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Anch'io nn sono esperto di gel 2D...
Cmq potrebbero essere dei contaminanti?
Oppure credo possa dipendere dal tipo di campione che stai analizzando...alcuni estratti cellulari hanno abbondanza di una singola proteina che va ha produrti un gran striscione che copre molti spot! Es. albumina nel plasma o IgG. Ci sono poi dei kit fatti ad hoc x degradare queste proteine. |
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Discussione |
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gel 2-d
Didattica e Relazioni
