Monociti-linfociti LPS...aggregati?

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presgian84
Nuovo Arrivato

Prov.: Pordenone
Citt�: San Vito al Tagliamento

12 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2007 : 21:48:39

Salve a tutti!
In un esperienza di laboratorio abbiamo stimolato una popolazione di linfociti e monociti umani con LPS. Dopo un'incubazione overnight si nota che si vengono a creare degli aggregati tra cellule... visto che monociti e linfociti sono piuttosto simili tra di loro almeno x quanto riguarda le dimensioni e cmq nn avevamo a disposizione un microscopio ottico decente per studiare la morfologia intracellulare al fine di discriminare di quali dei 2 tipi cellulari si trattasse, non riesco a capire se gli aggregati sono costituiti da monociti o da linfociti...qualcuno saprebbe illuminarmi a riguardo? gli aggregati si muovevano se la piastra veniva mossa e questo fa ipotizzare che si trattasse di linfociti (i monociti aderiscono al fondo della piastra)... chiedendo in giro xo' tutti dicono che si tratta di monociti.. mah! HELP!

E... il fatto che i monociti adesi siano piu' chiari dopo stimolazione con endotossina e' dovuto al fatto che hanno sintetizzato citochine come TNF-alpha etc?
GRASSIE A TUTTI QUELLI CHE SARANNO DISPONIBILI!

-Presgian-

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 23 giugno 2007 : 20:15:02

io lavoro coi linfociti e ti confermo che tendono ad aggregare. Tuttavia il fatto che siano in sospensione non ti permette di escludere che si tratta di monociti perch� anch'essi crescono in sospensione e solo se differenziano in macrofagi passano in adesione. Prova intanto a fare una colorazione tipo ematossilina/eosina, almeno per avere un'idea delle dimensioni e della localizzazione del nucleo (come saprai i linfociti hanno un nucleo molto grande ed eccentrico e scarsissimo citoplasma). Dopo di che potresti provare a caratterizzare la superficie cellulare marcandola con sostanze tipicamente espresse su linfociti o su monociti per cercare di capire cosa possano essere.

presgian84
Nuovo Arrivato

Prov.: Pordenone
Citt�: San Vito al Tagliamento

12 Messaggi

Inserito il - 24 giugno 2007 : 17:20:41

Intanto grazie!

Purtroppo noi non abbiamo messo fattori di differenziamento per i monociti (tipo GM-CSF)... non mi sembra che all'interno del terreno di coltura RPMI+FCS ci siano fattori di differenziamento del genere... ma assicuro che vedevo cellule adese al fondo! E non erano monociti quelli?

che dici?
E purtroppo ormai non ho piu' a disposizione le sospensioni cellulari (era un esperienza didattica e ci hanno dato si e no 3 nanosecondi per guardare)..quindi purtroppo niente ematossilina-eosina e tipizzazione della superficie....
Grazie dei consigli e se hai altre dritte sarai davvero ancor piu' d'aiuto!