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carmenzita85
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
15 Messaggi |
 Inserito il - 23 settembre 2007 : 12:31:43
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Salve a tutti!
Qualcuno mi potrebbe essere di aiuto in questo problema?
Per selezionare un retromutante leu+ da un auxotrofo per la leucina(leu-) di E. coli che tipo di terreno posso usare?
 PS. le scelte sono: minimo, minimo con leucina, complesso, complesso con leucina. Forse la domanda nn è formulata nel migliore dei modi xkè nn me la ricordo perfettamente, ma x favore datemi una mano.
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memole
Utente Junior
Prov.: Brindisi
Città: brindisi
577 Messaggi |
 Inserito il - 23 settembre 2007 : 14:31:54
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| Devi utilizzare un terreno minimo per poter selezionare il tuo mutante. Il motivo è semplice: il tuo ceppo è auxotrofo per la sola leucina e in assenza di essa non può crescere. Nonostante questo è prototrofo per tutti gli altri aminoacidi e per le vitamine. Pertanto per selezionare il retromutante di interesse ti basta piastrare le cellule su terreno minimo: se otterrai crescita vuol dire che sarai in presenza di colonie prototrofe per tutti gli elementi e quindi anche per la leucina. |
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carmenzita85
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
15 Messaggi |
Inserito il - 23 settembre 2007 : 15:37:26
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Grazie mille, la tua risposta è stata molto chiara ed esauriente 
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moonycinzia
Utente Junior
234 Messaggi |
Inserito il - 02 ottobre 2007 : 00:50:22
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Citazione:
Messaggio inserito da carmenzita85
Grazie mille, la tua risposta è stata molto chiara ed esauriente
Secondo voi non andrebbe bene anche un terreno leu-?
E' un po' come quando si utilzza un marcatore per selzionare i trasformanti, oltre alla resistenza per gli atibiotici si può usrae un terreno mancante di un aa sul quale cresceranno solo i trasformanti auxotrofi per lo stesso. |
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moonycinzia
Utente Junior
234 Messaggi |
Inserito il - 02 ottobre 2007 : 00:52:51
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Citazione:
Secondo voi non andrebbe bene anche un terreno leu-?
E' un po' come quando si utilzza un marcatore per selzionare i trasformanti, oltre alla resistenza per gli atibiotici si può usrae un terreno mancante di un aa sul quale cresceranno solo i trasformanti auxotrofi per lo stesso.
Dimenticavo...in questo modo si è certi che la mutazione riguardi solo la capacità di sintetizzare leu e che il ceppo non abbia acquisito altre resistenze in tal senso
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