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Eleo
Nuovo Arrivato
Prov.: Pavia
89 Messaggi |
 Inserito il - 28 settembre 2007 : 11:19:02
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ciao,
credo di avere problemi di contaminazione batterica in una coltura di HEK...ci sono puntini neri sparsi ovunque,ma sono su un altro piano focale.
Inoltre vedo dei claster che presumo essere aggregati di detriti cellulari. Non ho mai avuto problemi di contaminazione quindi non so cosa aspettarmi...
Grazie
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tommasomoro
Utente Junior
358 Messaggi |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 28 settembre 2007 : 12:01:48
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wow, la guida postata da tommasomoro è fantastica!!!
Eleo, ma i puntini neri che vedi si muovono? Ci sono molte cellule in sospensione? Vedi zone della piastra senza cellule? Ma soprattutto...di che colore è il mezzo???A me una volta è capitato di scambiare lo sporco della lente per una contaminazione batterica  |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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Eleo
Nuovo Arrivato
Prov.: Pavia
89 Messaggi |
Inserito il - 28 settembre 2007 : 12:51:30
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i puntini neri sul diverso fuoco sembrano immobili, il mezzo è virato di colore, ma non è ancora giallo giallo, la confluenza non è omogenea e le cellule morte in sospensione non sono moltissime, sembrano appena di più di una normale morìa.
grazie |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 28 settembre 2007 : 13:22:49
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| il mezzo ricco di metaboliti di scarto vira, ma questo dipende dalle variazioni di pH. man mano che le cellule consumano nutrienti e rilasciano rifiuti il pH del mezzo cambierà e dunque anche il colore, ma resta limpido. il mezzo è torbido o limpido? Poi cmq i puntini su un altro fuoco mi sembra strano per una contaminazione batterica... |
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Eleo
Nuovo Arrivato
Prov.: Pavia
89 Messaggi |
Inserito il - 28 settembre 2007 : 18:31:50
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sapevo che il viraggio di colore è indicativo del consumo di nutrienti e del rilascio di metaboliti di scarto, ma mi sorprendevano ugualmente quei puntini...ho deciso di lasciarle in coltura comunque fino a lunedì, così avrò la certezza di cosa sono...
grazie comunque
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 28 settembre 2007 : 19:57:33
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secondo me era meglio accertarsi se ci fosse o no una contaminazione. In questo modo se hai altre cellule in incubatore potresti rischiare di perderle.
facci sapere.
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Eleo
Nuovo Arrivato
Prov.: Pavia
89 Messaggi |
Inserito il - 29 settembre 2007 : 13:12:47
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| ho preso la decisione di lasciarle in coltura poichè nell'incubatore per ora ho solo le flask di HEK apparentemente contaminate e nessun'altra coltura a rischio di contaminazione...lunedì vi farò sapere... |
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elianthus
Nuovo Arrivato
Prov.: rm
Città: roma
1 Messaggi |
Inserito il - 14 febbraio 2008 : 22:45:33
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Ciao,volevo sapere che cosa mettete nell'incubatore per evitare le contaminazioni batteriche in particolare.
grazie elianthus |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 15 febbraio 2008 : 00:23:01
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| Nell'incubatore nulla... di solito antibiotico nel medium e un po' di cura nel maneggiare le cellule dovrebbero bastare! |
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pennaottica
Nuovo Arrivato
4 Messaggi |
Inserito il - 06 luglio 2017 : 11:23:05
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Buongiorno a tutti
Volevo chiedere aiuto per una questione che ci affligge da qualche mese. Abbiamo delle Hek in coltura ma troviamo una settimana si e una no una polverina bianca all'interno. premmettiamo che questa polverina bianca si manifesta a metà settimana e che i mezzi e la plasticheria sono in comune con altri gruppi che non hanno contaminazioni. Non è neanche un problema di operator perchè hanno provato 4 persone diverse a fare dei passaggi e sempre si è presentato il problema. La cosa strana inoltre e che molte volte alcune piastra sono con questa polverina altre no e il passaggio era lo stesso. Inoltre ho in coltura anche una linea stabile in selezione con G418 che però non ha mai presentato questo problema. Domanda, può essere una contaminazione da micoplasma? o qualcos'altro?
Grazie per l'aiuto |
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 06 luglio 2017 : 20:51:48
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il micoplasma di solito non si vede, ne vedi al massimo gli effetti (le cellule non crescono, non si trasfettano piu').
La "polverina" e' di solito una contaminazione batterica...
Se zoommi al max il microscopio vedrai che questa polverina si muove.
Se e' cosi' hai qualcosa contaminato...puo' essere la tripsina, il mezzo, l'FBS, il PBS o qualche pipetta... |
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato... |
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Discussione |
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contaminazione batterica di colture cellulari
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