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calcagnao
Nuovo Arrivato

Citt�: padova

25 Messaggi

Inserito il - 02 ottobre 2007 : 09:10:18

sto cercando di fare un'immunofluorecenza su cellule (adipociti) gi� trattati con mitotracker (Mol. probe, red). Ho fissato le cellule trattate con paraformaldeide 4% e poi ho proceduto all'immuno con un secondario fluorecente 488 Alexa fluor. pare per� che i 2 coloranti si "annullino". L'immuno da sola � sempre venuta bene e anche il mitotracker da solo. chiedo consiglio Grazie

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 02 ottobre 2007 : 13:00:55

Se vai su http://probes.invitrogen.com/resources/spectraviewer/ puoi vedere gli spettri dei tuoi fluorofori. Sembra che il MitoTracker possa essere in parte eccitato dalla luce emessa dall'Alexa... forse � quello il problema (o magari no)

Direi che la cosa pi� veloce � provare ad usare un secondario diverso per l'immuno, o il mitotracker in un altro colore (non so se esiste).

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calcagnao
Nuovo Arrivato

Citt�: padova

25 Messaggi

Inserito il - 03 ottobre 2007 : 10:04:22

grazie, penso che il problema sia propprio quello