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coccinellas
Utente Junior
Città: l'isola che non c'è
138 Messaggi |
 Inserito il - 28 ottobre 2007 : 09:49:43
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Ciao Ragazzi, ho una curiosità,
se su di un gel in sds, carico un campione non denaturato cosa succede?
Vedrò comunque delle bande o non cmparirà nulla?
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turok
Nuovo Arrivato
Prov.: Siracusa
Città: Siracusa
47 Messaggi |
Inserito il - 28 ottobre 2007 : 10:09:04
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Cara coccinella
x quel poco che ne so io l'SDS-Page si usa per conferire alle proteine una carica negativa (in modo da renderle uguali almeno dal punto di vista elettrico), in modo che le stesse possano migrare tutte in un gel elettroforetico in direzione anionica (ciò è detto anaforesi, mentre quando qualkosa migra verso il catodo si parla di cataforesi) e possano essere distinte solo in base alla loro massa (o PM o grandezza molecolare), cosicchè molecole più piccole migrano più velocemente di molecole più grosse.
In questo caso si usa un gel denaturante in modo da non interferire nella migrazione a causa della struttura secondaria, terziaria o quaternaria della proteina che potrebbe rimanere più facilmente imbrigliata tra le maglie della poliacrilammide (indipendentemente dalla dimensione o dal peso delle proteine).
Credo quindi che un elettroforesi delle proteine debba essere eseguita con un campione denaturato per questo motivo, ma comunque non saprei dirti se l'SDS potrà rivelarti qualkosa se le proteine non sono denaturate. Ho trovato quyalcosa che forse, potrà interessarti
POLYACRILAMIDE GEL ELECTROPHORESIS
(separazione delle proteine in base al peso molecolare):
Le proteine sono separate mediante elettroforesi in gel di poliacrilammide (SDS-PAGE): la separazione delle proteine e’ resa possibile sotto l’influenza di un campo elettrico applicato; la migrazione delle proteine avviene in base al loro peso molecolare.
Nell’SDS-PAGE le proteine vengono esposte al detergente Sodio Dodecil Solfato(CH3(CH2)11SO3-Na+) prima e durante l’elettroforesi; 1.4g di SDS si legano a ciascun grammo di proteina. Le cariche negative dell’SDS si respingono, le proteine multimeriche si dissociano nelle loro subunita’ e tutte le catene polipeptidiche sono forzate in conformazioni estese con carica simile. Il trattamento con SDS elimina le differenze di forma, quindi la lunghezza della catena polipeptidica, che riflette la massa, e’ l’unico determinante della velocita’ di migrazione.
Questo sembra risponderti pienamente.....
Spero di esserti stato utile.
Cordialmente Turok (azz quanto mi sento professionale in questo sito!!!!!!) e vi ricordo sempre I LOVE SCIENCE!!!!!!!!!! |
Non è perchè le cose sono difficili che non osiamo, ma è perchè non osiamo che le cose sono difficili.
Seneca.
è più facile spezzare un atomo che un pregiudizio.
Albert Einstein. |
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coccinellas
Utente Junior
Città: l'isola che non c'è
138 Messaggi |
Inserito il - 28 ottobre 2007 : 11:29:48
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| Grazie Turok! |
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