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SilviaDT
Nuovo Arrivato
Prov.: Brindisi
Città: Brindisi
3 Messaggi |
 Inserito il - 10 dicembre 2007 : 16:20:14
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Ciao a tutti...mi serve un esperto in western..la tecnica non i film...!!normalmente utilizzo per i miei western l'actina come controllo della quantità per poter fare studi successivi di densitometria ma per la rilevazione della banda uso un sistema (fosfatasi alcalina) diverso da quello che uso per la banda di interesse (perossidasi)...in entrambi i casi è un metodo colorimetrico..praticamente taglio il filtro a metà e coloro separatamente....ma ha senso???ho come l'impressione che non ci sia confronto tra bande visualizzate con due metodi diversi se non altro perchè i tempi di colorazione sono molto diversi...spero di essere stata chiara...illuminatemi!!
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Luca-DNA
Nuovo Arrivato
Prov.: Torino
Città: Torino
68 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2007 : 21:42:54
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Il controllo di caricamento, ossia il controllo della quantità di actina nei campioni diversi, avviene tra i diversi campioni: tu devi confrontare la banda dell'actina dei diversi campioni, non ti interessa di confrontare l'actina con la banda di interesse. Per questo motivo non cambia nulla se utilizzi un metodo (perossidasi) piuttosto che l'altro (fosfatasi alcalina): l'importante è che le bande che confronti (quindi tutte le actine) nei vari campioni siano rilevate con lo stesso metodo!!! Per farla breve, continua così che dovrebbe andare bene...
Ciao
Luca |
A scientific man ought to have no wishes, no affections, - a mere heart of stone. (C. Darwin) |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 11 dicembre 2007 : 01:59:05
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Beh, io in realtà ho sempre misurato il campione rispetto all'actina e poi usavo questi rapporti per il confronto tra i vari campioni.
Il risultato, comunque, è matematicamente lo stesso e comunque essendo misure relative e non assolute non ci sono problemi a usare due metodi diversi, basta farlo coerentemente (cioè, non andrebbe bene fare metà dell'actina in un modo e l'altra metà in un altro modo). |
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