Ciao a tutti, sto preparando l'esame di diagnostica biotecn e ho 2 domande da farvi: 1.sulle slides sulle quali sto studiando c'è scritto che nella cop (competitive oligopriming) quando si preparano le sonde ASO bisogna definire una sequenza normale e una mutata per ogni filamento di dna..cioè 4 diversi oligo,2 normali e 2 mutati. ma perchè, dal momento che il primer reverse è comune??? forse nelle slides si voleva intendere per ogni ALLELE e non per ogni filamento di dna, in maniera tale da vedere se il soggetto è omozigote oppure eterozigote per la mutazione.. please help me..
oops ho dimenticato la seconda domanda, sulla LCR: non ho capito se dopo che gli oligo sono stati legati dalla dna ligasi, avviene l'amplificazione da parte della polimerasi come nella PCR o no. il nuovo oligo che si è creato, cioè quello proveniente dalla ligazione dei due oligo, viene usato come primer?? grazie!