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ALESSANDRAC
Nuovo Arrivato

Prov.: Pavia
Città: Gambolo'

9 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2008 : 13:39:07

Ciao, è da qualche mese che faccio western Blot e ultimamente mi capita che verso la fine della corsa dei campioni nel gel, questi si stortino e facciano come un onda. Perchè, se hanno corso dritto per i 3/4 del gel?Io uso running e stacking gel al 10% ed ho provato anche a lasciarlo polimerizzare per un giorno intero in frigo.Il buffer è running buffer 1% preparato fresco al momento.
Che devo fare per farli tornare dritti?Ah dimenticavo, mi capita una volta sì ed una no....
Grazie
Ale

domi84
Moderatore

Città: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2008 : 14:32:49

Mmm...ogni tanto succede anche a me...
io ho attribuito la causa al buffer di recupero...per cui faccio sempre il buffer daccapo...tu usi sempre buffer nuovo? o anche quello recuperato? (magari una volta si e una no?!?

)

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...

ALESSANDRAC
Nuovo Arrivato

Prov.: Pavia
Città: Gambolo'

9 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2008 : 14:47:25

Di solito mi tengo un running buffer 10X pronto e ogni volta che faccio w.b. mi preparo quello diluito a 1X. Ma i risultati come ti vengono?Con le bande storte?

domi84
Moderatore

Città: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2008 : 16:17:43

Citazione:
Ma i risultati come ti vengono?Con le bande storte?

Effettivamente no...le bande vengono bene...
A me è il laemly che forma queste onde...

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...

ALESSANDRAC
Nuovo Arrivato

Prov.: Pavia
Città: Gambolo'

9 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2008 : 16:57:22

Ah, ma io uso sempre lo stesso e per i primi mesi ho avuto bande dritte.Va beh grazie cmq, se ti viene in mente altro fammi sapere.
Ale

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2008 : 22:22:25

Puoi provare a rallentare un po' la corsa, a volte aiuta.
Controlla anche che gli elettrodi non siano sporchi altrimenti il campo elettrico generato non è uniforme.

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Dionysos
Moderatore

Città: Heidelberg

1913 Messaggi

Inserito il - 25 gennaio 2008 : 00:46:26

Il motivo è uno solo:

la cameretta interna rimane a secco di running buffer!

non sai quante volte mi è successo

Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 25 gennaio 2008 : 02:38:17

davvero? a me non è mai capitato... non è che il voltaggio (e quindi la temperatura) è troppo alto?

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