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Nica
Nuovo Arrivato
Città: Firenze
14 Messaggi |
 Inserito il - 13 febbraio 2008 : 10:44:00
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Salve! Devo scoprire il peso molecolare di una proteina sconosciuta.
Che tecnica posso usare? Qualcuno mi può indicare dove posso trovare un protocollo?
grazie
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 11:51:20
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Forse dovresti darci un po' di informazioni in più...
Se sai dell'esistenza di questa proteina evidentemente l'avrai purificata o trovata in qualche modo...
Comunque una SDS-PAGE credo sia la soluzione più veloce. |
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darkene
Utente Junior
291 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 11:54:41
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| cosa sai della proteina? |
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PostHc
Nuovo Arrivato
Prov.: Lecce
Città: lecce
6 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 12:18:18
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| SDS gel poliacrilammide,dato ke separa le prot in base al p.m. |
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là
Utente Junior
565 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 17:46:32
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| SDS- page, fai piu' in fretta di sicuro. |
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Nica
Nuovo Arrivato
Città: Firenze
14 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 18:11:20
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Allora di questa sospetto solo della sua esistenza, sapendo che SE ESISTE sarà composta da due subunità di cui una nota.
Vi pare che il western possa aiutarmi? |
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hodla
Nuovo Arrivato
Prov.: FG
Città: San Giovanni Rotondo
4 Messaggi |
Inserito il - 14 febbraio 2008 : 12:46:22
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| Sì, però questo vuol dire che esiste l'anticorpo specifico...giusto? |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 14 febbraio 2008 : 13:24:20
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Se hai l'anticorpo contro la subunità nota, facendo un western su gel di SDS PAGE
puoi rilevare se la subunità nota c'è, ma non se è associata ad un'altra eventuale
seconda subunità (a meno che tu non abbia un'anticorpo diretto anche contro quella,
e allora facendo due incubazioni di primario dovresti trovare le due bande delle
due subunità separate, senza però acquisire informazioni sulla loro associazione).
Una volta fatto tutto questo, per verificare l'associazione delle subunità
forse ci vorrebbe (ma non so se sia il metodo migliore) un western diretto
contro un gel nativo, affidabile purchè l'anticorpo non sia diretto
contro un epitopo interno alla struttura foldata... |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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cuccurullom
Nuovo Arrivato
Città: napoli
14 Messaggi |
Inserito il - 28 febbraio 2008 : 17:12:18
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Potresti fare molto velocemente utilizzando la spettrometria di massa.
Ti basta uno strumento con sorgente elettrospray ed un analizzatore singolo quadrupolo...in genere i laboratori di chimica organica e analitica ne hanno uno...
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peso molecolare proteina
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