Colorazione cellula mitotica

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Elsar
Nuovo Arrivato

15 Messaggi

Inserito il - 19 agosto 2008 : 17:38:29

Salve a tutti. C'� qualcuno che saprebbe dirmi quali sono i coloranti utilizzati per colorare in rosso l'actina e verde i microtubuli quando analizziamo una cellula in mitosi?
Grazie a tutti anticipatamente

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 19 agosto 2008 : 17:58:11

Mah, immagino si usino anticorpi marcati... puoi usare i coloranti che vuoi tu. Chess� Texas Red oppure rodamina per il rosso e Oregon Green per il verde, tanto per dirne qualcuno. Puoi anche farlo rosso e blu o giallo e verde volendo!

Guarda qui ad es.:
http://probes.invitrogen.com/servlets/spectraviewer

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GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 20 agosto 2008 : 01:19:57

Beh di solito pi� che un anticorpo per marcare l'actina si utilizza falloidina marcata (fluorescente), la falloidina si lega solo ai filamenti di actina e non all'actina libera; per la tubulina invece si utilizzano anticorpi.
E' vero che puoi poi scegliere i colori che vuoi, per� i colori pi� utilizzati sono rosso e verde.
In genere nelle cellule si usa falloidina rossa e anti-tubulina verde (in realt� � l'anticorpo secondario che � arcato in verde), il motivo esatto della scelta di questi 2 colori e non il contrario non lo so, per� in effetti l'actina si vede meglio nelle cellule con il rosso!

Infine di solito si utilizza anche il DAPI (blu) per colorare i nuclei, sopratutto se si tratta di cellule in mitosi!

Questi sono un po' di esempi di immagini prese in internet.