Salve a tutti sono nuova e spero che qualcuno possa darmi qualche dritta... Mi sto occupando, da poco, di colocalizzazione al confocale di due enzimi espressi in cellule murine di derivazione mieloide. Fino ad ora non sono riuscita ad ottenere un segnale che si staccasse in modo netto da quello ottenuto con gli isotipi. Uno dei problemi sta nel fatto che non posso piastrare e far crescere le cellule direttamente sui coprioggetti in quanto si differenziano in cellule diverse, quindi devo lavorare con cellule in sospesione ma non reisco a trovare buoni protocolli per la fissazione e la permeabilizzazione. Qualcuno ha qualche consiglio su che fissativi e permeabilizzanti utilizzare? Grazie a tutti!