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sarae
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 01 marzo 2009 : 22:49:56

Salve,sono una nuova iscritta ed ho conosciuto il sito grazie a google, sono neolaureata in biologia,e da poco ho iniziato ad utilizzare l'HPLC, uno strumento sofisticato ma difficile. Ho seri problemi sulla standardizzazione, avete materiale su questo argomento? il mio problema e: se io preparo ad esempio uno standard di 20 mg/ml ed inietto nello strumento 100 microlitri; nel cromatogramma dello standard devo considerare la variabile 100 microlitri? e quando vado a calcolare le concentrazioni dei miei campioni?..... aiutoooooooooooooooo

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 01 marzo 2009 : 23:54:38

Mai fatto HPLC in vita mia... ma direi proprio di s�!

Se hai 20 mg/ml e inietti 100 microlitri, starai iniettando 2 mg di sostanza, quindi l'AUC del tuo picco sar� corrispondente a 2mg, non a 20mg!!!
Stesso per i campioni. Trovi quanti mg c'erano nella quantit� che hai iniettato e poi da l� risali alla concentrazione.

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Shamo
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2009 : 23:40:41

Ciao
no non devi tenere conto dei 100microlitri di iniezione la conccentrazione del tuo standard � sempre 20mg/ml e all'interno dell'hplc non subisce nessuna diluizione.

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 04 marzo 2009 : 07:47:49

E no scusa! Questo vale solo se inietti sempre lo stesso volume per tutti i campioni, altrimenti devi guardare anche il volume.

E poi dovrebbe dipendere da che tipo di detector hai no?