perdita delle proteine in western blot

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daber87
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2012 : 13:39:00

Buongiorno a tutti, vi spiego il mio problema:
Durante un western blot, ho la completa perdita di proteine dalla membrana di nitrocellulosa. Tramite Ponceau staining so di avere le proteine sulla membrana dopo il trasferimento dal gel, ma dopo la detection, dove non ho alcun segnale, sempre tramite ponceau, scopro che tutte le proteine sono andate perdute, eccezion fatta per il marker. Non � un problema di soluzioni (preparate nuove), pH (verificato, anche quello dell'acqua), n� c'� conflitto tra blocking e anticorpo. Cosa pu� essere? forse la membrana non riesce a trattenere le proteine? Per� � quella che abbiamo sempre usato, e non ha mai dato problemi... grazie per il vostro contributo!
Un saluto da Stoccolma :)

Davide

supererry
Nuovo Arrivato

Prov.: Torino
Citt�: Torino

82 Messaggi

Inserito il - 05 ottobre 2012 : 21:43:24

che trasferimento utilizzi?

l�
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 06 ottobre 2012 : 12:12:51

e se fosse un problema di porosit� della membrana di nitrocellulosa?