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vittorio84
Nuovo Arrivato

Città: napoli


8 Messaggi
Inserito il - 04 dicembre 2007 : 16:39:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di vittorio84 Invia a vittorio84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
salve a tutti,vorrei porre una domanda sulle library cdna che non ho capito molto bene....sxo che ci sia qualcuno che che mi aiuti!!!
La mia prof ha detto che nella costruzione della library a cdna bisogna costruire due filamenti...
il primo:viene costruito con l'aiuto della trascrittasi inversa la quale si attacca ad un primer (es.poli T) e sintetizza
per quanto riguarda invece il secondo filamento prima si usava una tecnica vecchia in cui si sfruttava la capacità del doppio filamento di ripiegarsi su se stesso effettuando un'idrolisi alcalina per allontanare l'rna solo che così facendo si perdeva la zona codificante;perciò oggi si usa una nuova tecnica in cui interviene una rnasi H che idrolizza l'rna quando è a doppio filamento con il dna si ottengono così dei frammenti che vengono usati come primer dalla dna polimerasi.

Io adesso vorrei sapere una cosaaa nella tecnica vecchia per fare il secondo filamento quando ho scritto che si sfruttava la capità del doppio filamento di ripiegarsi su se stesso:ma qst dopio filamento è fatto da rna e dna o è solo un doppio filamento di dna?cioè mi spiegate meglio la tecnica vecchia perchè non ho capito un gran chè.....grazieeeeee

vittorio84
Nuovo Arrivato

Città: napoli


8 Messaggi
Inserito il - 07 dicembre 2007 : 12:28:06  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di vittorio84 Invia a vittorio84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Messaggio inserito da vittorio84

salve a tutti,vorrei porre una domanda sulle library cdna che non ho capito molto bene....sxo che ci sia qualcuno che che mi aiuti!!!
La mia prof ha detto che nella costruzione della library a cdna bisogna costruire due filamenti...
il primo:viene costruito con l'aiuto della trascrittasi inversa la quale si attacca ad un primer (es.poli T) e sintetizza
per quanto riguarda invece il secondo filamento prima si usava una tecnica vecchia in cui si sfruttava la capacità del doppio filamento di ripiegarsi su se stesso effettuando un'idrolisi alcalina per allontanare l'rna solo che così facendo si perdeva la zona codificante;perciò oggi si usa una nuova tecnica in cui interviene una rnasi H che idrolizza l'rna quando è a doppio filamento con il dna si ottengono così dei frammenti che vengono usati come primer dalla dna polimerasi.

Io adesso vorrei sapere una cosaaa nella tecnica vecchia per fare il secondo filamento quando ho scritto che si sfruttava la capità del doppio filamento di ripiegarsi su se stesso:ma qst dopio filamento è fatto da rna e dna o è solo un doppio filamento di dna?cioè mi spiegate meglio la tecnica vecchia perchè non ho capito un gran chè.....grazieeeeee


perchè nessuno mi rispondeee????rispondete anche se ho scritto una cavolata!
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ilarip
Utente Junior

haci

Prov.: Bologna
Città: Bologna


432 Messaggi
Inserito il - 07 dicembre 2007 : 13:22:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ilarip  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di ilarip Invia a ilarip un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao
mi dispiace nn esserti d'aiuto ma anche io questo argomento l'ho trattato come te a lezione e sul libro che sto usando io per preparare tale esame (Strachan terza edizione) nn dice nulla di più di quello che hai detto tu (nn parla nenache della vecchia tecnica)
prova a consultare un buon libro di genetica tipo il Pears
Ho imparato.. .che le opportunità non vanno mai perse.
Quelle che lasci andare tu...le prende qualcun altro
Ho imparato...che è meglio dare consigli solo in due circostanze...
Quando sono richiesti e quando ne dipende la vita.
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