LB Broth

Per 1l di terreno:

Triptone 10 g
Yeast Extract 5 g
NaCl 10 g

Si sciolgono le polveri in 800 ml di H2O distillata, si porta a pH con NaOH oppure HCl e poi si porta a volume.

Autoclavare 15 minuti a 121 °C

Conservare a 4° C


LB Agar

Per 1l di terreno solido:

Agar batteriologico 01 15 g

In terreno LB liquido già a volume e ph.
Sciogliere su piastra riscaldante oppure in forno a microonde.

Autoclavare 15 minuti a 121 °C

Dispensare il terreno ancora caldo in piastre petri sterili:
20 ml in piastre da 90 mm di diametro e 10 ml in piastre da 60 mm di diametro.

Se al terreno solidi devono essere aggiunti antibiotici, IPTG oppure X-gal assicurarsi che la temperatura sia scesa a ca 60° C (empiricamente se si può tenere la bottiglia in mano)

Conservare le piastre a 4° C


SOC

Per 1l di terreno:

Triptone 20 g
Yeast Extract 5 g
NaCl 0.5 g

Si sciolgono le polveri in 800 ml di H2O distillata.

KCl 250 mM 10 ml
(1.86 g per 100 ml di H2O)

Aggiustare il pH a 7.00 con NaOH e portare a volume.

Autoclavare 15 minuti a 121 °C

Conservare a 4° C

Prima dell’uso supplementare con:

MgCl2 2M 5 ml
Sterilizzato con un ciclo in autoclave.

Glucosio 1M 20 ml
Sterilizzato mediante filtrazione con filtro per siringa sterile 0.2 μ.

L’SOC una volta supplementato va aliquotato e conservato a -20° C.

TB (Terrific broth) Broth

Per 1l di terreno:

Triptone 12 g
Yeast Extract 24 g
Glicerolo 4 ml

Si sciolgono le polveri in 950 ml di H2O distillata.

Autoclavare 15 minuti a 121 °C

Conservare a 4° C


TP

KH2PO4 170 mM 2.31 g
K2HPO4 720 mM 12.54 g

IN 100 ML DI H2O

Autoclavare 15 minuti a 121 °C

Conservare a 4° C