Mini prep
Descrizione
questo protocollo serve ad estrarre il DNA trasformato in cellule competenti
Prendere le cellule fatte crescere per una notte a 37°C e in movimento (225rpm) in 6ml di LB + 6 µl di Ampicilina.Mettere 1.5ml di cellule in un tubo Eppendorf.Spinnare a 14.000 rpm per 30 secondi.Buttare il sopranatante e risospendere il pellet in 100microl di TELT Buffer.Aggiungere 100microl di fenolo-cloroformio, vortexare.Centrifugare a 14.000 rpm per 10 minuti.Prendere il sopranatante e metterlo in un nuovo tubo Eppendorf.Aggiungere 2.5 volumi di etanolo 100% e mixareMettere a -20°C per un'ora.Centrifugare a 14.000 rpm per 10 minuti.Risospendere il pellet con etanolo 70%.Spinnare per un minuto circaRisospendere in pellet in 25 µl di ddH2O.