Congelamento MEF

Descrizione

I fibroblasti embrionali murini vengono prodotti in grandi quantità, congelati e quindi mantenuti per mesi ad una temperatura di
- 80°C.

Materiale Chimico

Dimetilsofossido, DMSO (Euroclone);
Siero fetale bovino, FBS (E.U.) (Sigma-Aldrich).

Metodo

Le cellule vengono staccate dalla piastra ad una confluenza dell’ 80-90% mediante tripsina/EDTA, centrifugate a 1200 rpm e risospese con 1ml di soluzione crioconservante costituita al 90% di siero fetale bovino e al restante 10% di DMSO. Subito dopo vengono congelate nelle apposite criovials a -80°C.