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Congelamento di neurosfere Descrizione Questo protocollo è una guida al congelamento di neurosfere. - Dopo il prelievo e la centrifugazione, il pellet contenente le neurosfere viene risospeso in un terreno di congelamento così costituito (per 100 ml): ° DMEM/F12 in rapporto 1:1 (42,75 ml + 42,75 ml) ° Glucosio 30% (2 ml) ° HEPES (0,5 ml) ° Neurocult supplements (10 ml) ° Penicillina/Streptamicina (1 ml) ° Glutammina (1 ml) ° DMSO (15 ml) - La soluzione viene poi aliquotata in criovials da 1,5 ml e poste a -20°C per 2 ore. - Successivamente le vials si passano a -80°C over-night e il giorno dopo in azoto liquido. |
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