Congelamento di neurosfere

Descrizione

Questo protocollo è una guida al congelamento di neurosfere.

- Prelievo neurosfere

- Dopo il prelievo e la centrifugazione, il pellet contenente le neurosfere viene risospeso in un terreno di congelamento così costituito (per 100 ml):

° DMEM/F12 in rapporto 1:1 (42,75 ml + 42,75 ml)
° Glucosio 30% (2 ml)
° HEPES (0,5 ml)
° Neurocult supplements (10 ml)
° Penicillina/Streptamicina (1 ml)
° Glutammina (1 ml)
° DMSO (15 ml)

- La soluzione viene poi aliquotata in criovials da 1,5 ml e poste a -20°C per 2 ore.

- Successivamente le vials si passano a -80°C over-night e il giorno dopo in azoto liquido.