- Dopo aver staccato le cellule con PBS-EDTA, esse vengono raccolte in una provetta e centrifugate, il pellet ottenuto è stato risospeso in 1,5 ml di DMEM-FCS 40%; poi si aggiungono 1,5 ml di DMEM-DMSO 20%. Quest’ultimo ha una funzione protettiva nei confronti delle membrane durante il congelamento.

- La sospensione cellulare, aliquotata in criovials da 1,5 ml, viene poi posta a -20°C per 1 ora, poi a -80°C over-night, prima del passaggio in azoto liquido.