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erbamedica
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Cittā: robecco sul naviglio
20 Messaggi |
 Inserito il - 14 gennaio 2013 : 17:09:11
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Salve a tutti
vorrei sapere se qualcuno di voi ha esperienza nella trasformazione di Lactobacillus plantarum, sto cercando di trasformarlo con 4 plasmidi diversi luc GR , luc MP, pnz8048 lux e pnz T5 lux.
il protocollo che uso per fare le comeptenti č questo:
Species = L. plantarum
Dilution = 1/50
Growth = 2% Glycine, MRS, 3 hrs, 37°C, shaking
Wash = 2X water; 1X 50mM EDTA; 2X E Buffer. ALL ICE COLD
Buffer = 0.5M Sucrose, 10%Glycerol
Concentration = 1/100
Voltage = 12,000 V/cm
Recovery = 2hrs MRS 30°C
il problema naturalmente č che non ottengo colonie con inserito nessuno di questi plasmidi .Se qualcuno avesse qualche suggerimento ne sarei super felice
grazie in anticipo
Ornella
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Ornella ;) |
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