Cicli soglia e diluizioni.

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Krisia
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Inserito il - 09 febbraio 2017 : 15:38:33

Salve la mia domanda riguarda i fattori che concorrono alla linearit� di una reazione di RT-PCR con tecnica Real Time. Nel saggio che utilizzo si prevede di allestire una curva di calibrazione costituita da: standard tal quale, diluizione 1:10, 1:20 e 1:40. Teoricamente dovrei quindi avere 3,3 cicli soglia tra il mio standard tal quale e la sua diluizione 1:10, un ciclo soglia tra 1:10 e 1:20 e un altro ciclo soglia tra la diluizione 1:20 e quella a 1:40. Ultimamente tuttavia tra il tal quale e la diluizione 1.10 non riesco a ottenere meno di 3.6 cicli mentre tra le altre tre diluizioni rispetto sempre il ciclo soglia di differenza. Il problema non sussiste se nell'esperimento costruisco la curva con diluizioni seriali allo stesso fattore (1.10 -1.100 -1.1000 oppure 1.2 -1.4- 1.8 1-16) A cosa pu� essere dovuto questo problema?
Grazie per l'attenzione.