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asia84
Nuovo Arrivato
Prov.: reggio calabria
30 Messaggi |
 Inserito il - 23 agosto 2007 : 00:59:24
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Ciao a tutti, mi sono appena registrata....complimenti per il forum...è utilissimo . C'è qlc che può aiutarmi? Avrei bisogno di alcuni chiarimenti :
- Differenza tra pcr competitiva e non competitiva
Grazie in anticipo 
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 23 agosto 2007 : 10:18:45
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Allora, se non mi ricordo male, le PCR competitiva e non competitiva sono entrambe quantitave...Nella PCR competitiva nel mix hai il gene di interesse da amplificare, un altro gene a concentrazione nota e uno stesso paio di primers che si ibridano allo stesso modo con entrambi i geni (competitiva perché c'è competizione per i primers)...Confrontando quanto ti si è amplificato il gene a concentrazione nota con quello di tuo interesse, riesci a risalire alla concentrazione iniziale del gene di tuo interesse...
Nella PCR non competitiva fai correre in parallelo in mix diversi la reazione di amplificazione del tuo gene di interesse in una eppendorf, e in altre l'amplificazione di un gene a concentrazione nota, preò in ogni eppendorf metterai una concentrazione diversa di questo gene, dopodiché andrai a confrontare l'amplificato del gene di tuo interesse con quelli delle altre eppendorf a concentrazione nota...L'eppendorf che ti darà la stessa concentrazione di amplificato di quella del gene del tuo interesse ti servirà per dire che all'inizio dell'amplificazione il tuo gene aveva la stessa concentrazione del gene a concentrazione nota...
Mi sembra debba essere una cosa del genere, nel caso aspetto smentite... |
 
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asia84
Nuovo Arrivato
Prov.: reggio calabria
30 Messaggi |
Inserito il - 23 agosto 2007 : 14:23:36
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Grazie, siete stati gentilissimi, mi avete chiarito le idee... |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 23 agosto 2007 : 18:44:05
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Ehm, devo fare un edit...Nella PCR competitiva i mix sono seprati ma i primers sono gli stessi, nella non competitiva il mix è unico con un gene a concentrazione nota e primers diversi...Mi sembrava che ci fosse qualcosa che non andava...Chiedo scusa... |
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asia84
Nuovo Arrivato
Prov.: reggio calabria
30 Messaggi |
Inserito il - 24 agosto 2007 : 01:17:08
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| Grazie schuldiner 86 |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 24 agosto 2007 : 09:19:33
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Citazione:
Messaggio inserito da asia84
Grazie schuldiner 86
De nada!!! |
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