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manubio
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 12:13:08

Ciao a tutti!
Ho effettuato una maxi prep però la prima centrifugata l'ho fatta a 13000 rpm e non a 6000 in quanto ho seguito un protocollo errato. Mi hanno detto che così facendo ho distrutto i batteri... Volevo sapere se è vero! Effettivamente il risultato non è stato eccezionale.
Vi ringrazio!

thejoint84
Nuovo Arrivato

46 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 20:47:01

E´ probabile.... Io con Coli a volte uso 8000 rpm 5 min, e la differenza di densitá del pellet si vede rispetto alle centrifugate normali..... per risospenderlo ce ne vuole! 13.000rpm sono tanti!!!

http://cornermolecularbiology.blogspot.com/

cidsmoke
Utente Junior

534 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 21:24:51

Molto probabile...praticamente li hai frullati!

Martin.diagnostica
Utente Attivo

1582 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2011 : 22:07:16

Ho dei seri dubbi che con la tua centrifugata hai distrutto i batteri. Quando facevo le purificazioni di proteine ricombinate hist-tag per lisare i batteri dovevo sottoporli a pressioni elevatissime in French Press, magari bastasse dargli una botta in centrifuga

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giorgia22
Nuovo Arrivato

15 Messaggi

Inserito il - 31 maggio 2011 : 11:35:30

Sono daccordo con Martin .. lavoro con i batteri lattici, e da una brodocoltura per recuperare le cellule da usare come inoculo per la produzione di un lievito naturale ad es, uso velocità di 10000 anch 11000 .. se poi penso ai vari step di cui si compone l'estrazione del dna batterico, non mi sembra possibile distruggere i batteri con una semplice centrifuga.
Ciao!

HPLC
Nuovo Arrivato

Città: Algeri - Reggio Emilia

18 Messaggi

Inserito il - 31 maggio 2011 : 11:53:19

Per me li hai distrutti, gia a 10000g si separa citoplasma da membrane e nuclei, a 13000.... ma supratutto, per quanto tempo lo hai fatto?

Domani é un'altro giorno

manubio
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 06 giugno 2011 : 16:36:47

L'ho effettuata per 15 minuti!!
Grazie