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Ely86
Nuovo Arrivato
Città: milano
100 Messaggi |
 Inserito il - 27 settembre 2011 : 10:37:11
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ciao,
premetto che sono una capra n genetica perciò qualcuno può spiegarmi in modo semplice cos'è la dominanza negativa? a lezione il prof l'ha spiegata con l'esempio dell'osteogenesi ma non ho capito!grazie
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2011 : 18:29:11
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Una mutazione dominate negativa è una mutazione che porta alla formazione di un prodotto mutato il quale "interferisce" anche con la funzione di quello normale.
Un esempio semplice è quello di una proteina che funziona come dimero, se tu hai sia la proteina mutata che quella wt quando si forma il dimero mut+wt comunque non sarà funzionale, quindi il mutato "domina" negativamente sul wt.
In questa presentazione trovi un'immagine per l'osteogenesi imperfetta: http://www.personalweb.unito.it/ferdinando.dicunto/Lezione11.ppt
Detto in 2 parole: il collagene è formato da una tripla elica, se una delle eliche è mutata si formerà una tripla elica "difettosa". Quindi la mutazione è dominante negativa.
(nella figura della presentazione è spiegato più dettagliatamente)
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Lucaleo
Nuovo Arrivato
100 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2011 : 19:32:08
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| Un altro bell'esempio di "dominanza negativa" è rappresentato dalle mutazioni dell'oncosoppressore p53. Si tratta di una proteina che funziona come omotetramero e la mutazione di un solo allele porta alla formazione di tetrameri misti tra monomeri wt e mut che non sono funzionali. |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2011 : 20:18:50
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E visto che ci sono invischiato in questi giorni con il mio corso, quoto in un colpo solo due passi ispiratori dell'Alberts a proposito dei RTK (Receptor Tyrosine Kinase):
Citazione:
Because of the requirement for receptor dimerization, it is relatively easy to inactivate a specific RTK to determine its importance for a cell response. For this purpose, cells are transfected with DNA encoding a mutant form of the receptor
that dimerizes normally but has an inactive kinase domain. When coexpressed at a high level with normal receptors, the mutant receptor acts in a dominant negative way, disabling the normal receptors by forming inactive dimers with them.
The mutant receptor with an inactivated kinase domain can dimerize normally, but it cannot crossphosphorylate a normal receptor in a dimer. For this reason, the mutant receptors, if present in excess, will block signaling by the normal receptors—a process called dominant-negative regulation. Cell biologists frequently use
this strategy to inhibit a specific type of RTK in a cell to determine its normal function. A similar approach can be used to inhibit the function of various other types of receptors and intracellular signaling proteins that function as dimers or larger oligomers.
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luprodam
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 26 ottobre 2011 : 14:52:59
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| alcune idee per vedere il fatto monomero dimero pero con le teniche biochimiche? |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 26 ottobre 2011 : 18:56:18
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Cioè? Per dimostrare che dimerizzano?
Penso un'idea sia una Blue Native Page, purificando prima la proteina di interesse (wild type and mutant) con un'immunoprecipitazione mediata da un Ab incapace di discriminare tra le due forme. Oppure con un EMSA, incubando in vitro la forma wt e la mutata.
Per dimostrare che l'eterodimero perde la capacità di interagire con un partner dell'omodimero wild-type?
Una volta che dimostri che prot wt e mut dimerizzano puoi ripetere gli stessi esperimenti di cui sopra usando l'eterodimero contro la tua proteina di interesse.
In vitro, potresti provare anche con la Surface Plasmon Resonance usando un bel Biacore, ma qui si va più sul complicato credo, in termini di ottimizzazione dell'esperimento. Giusto una settimana fa stavo comunque leggendo un paper del mio lab in cui un forte indizio che tre particolari proteine siano in grado di formare un eterotrimero proveniva proprio da questo genere di esperimento.
Qualcuno mi dia un parere.
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dominanza negativa
